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液相色譜在藥物分析的應(yīng)用

更新時(shí)間:2022-08-08  |  點(diǎn)擊率:1424

液相色譜不受分析對(duì)象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中,可用氣相色譜分析的約占20%,而80%則需用液相色譜來分析。液相色譜已經(jīng)廣泛應(yīng)用于藥物的含量測定、組成分析、質(zhì)量控制等方面。近年來 液相色譜在藥物分析的應(yīng)用 中占主要地位。


液相色譜在天然藥物及復(fù)方成藥分析中的應(yīng)用


ELSD能夠測定沒有紫外吸收或?yàn)樽贤饽┒巳跷盏臉悠?,天然產(chǎn)物中的許多成分無疑找到了直接、準(zhǔn)確的測定方法。ELSD在天然產(chǎn)物及其復(fù)方成藥分析中的應(yīng)用報(bào)道主要有皂苷類、生物堿類、萜類內(nèi)酯等。皂苷無紫外吸收或僅為末端吸收,ELSD能夠?qū)ζ洳唤?jīng)衍生進(jìn)行檢測,在HPLC—ELSD的應(yīng)用中這方面的報(bào)道多。主要有一次性分離分析天然人參、生脈散復(fù)方、育精膠囊中的多種人參皂苷;西洋參中的人參皂苷和擬人參皂苷定量測定;三七中的三七皂苷的含量分析;黃芪、黃芪注射液和保元湯中的黃芪皂苷、黃芪甲甙的分離和測定;麥冬中的甾體皂甙元;天麻中的天麻甙的含量測定等。這些研究主要采用Cl8柱、乙晴與水作流動(dòng)相,不經(jīng)衍生直接測定多組分含量,結(jié)果顯示方法靈敏度高(一般檢測限低于3μg/m1)、線性關(guān)系良好。對(duì)于無紫外吸收的生物堿類成分,ELSD同樣顯示出操作簡單、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。對(duì)比HPLC—UV法測定貝母中的甾類貝母生物堿,采用ELSD檢測器,不但不需衍生化操作,提高了結(jié)果的準(zhǔn)確度,而且可檢測出不含雙鍵的貝母甲素,對(duì)動(dòng)物體內(nèi)的生物堿類成分如河豚du素,無紫外吸收且安全性低,不適合衍生化法,可用ELSD法進(jìn)行檢測,獲得滿意結(jié)果。銀杏作為一種保健藥品,其主要活性成分為黃酮類和萜類內(nèi)酯,以往銀杏中的萜類內(nèi)酯成分主要采用HPLC—UV法和HPLC—RI測定,但由于萜類內(nèi)酯紫外吸收差,又含少量物質(zhì)的干擾,結(jié)果穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性較差。隨著ELSD的發(fā)展和普及,這些方法已經(jīng)逐漸被ELSD法所取代。


液相色譜在抗生素分析中的應(yīng)用


生產(chǎn)抗生素時(shí),首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如:青霉素、四環(huán)素、頭孢子菌素、紅霉素、柔紅霉素、慶大霉素等的發(fā)酵產(chǎn)物,均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動(dòng)相或用離子對(duì)法,分析主體及其收產(chǎn)物的含量。對(duì)普魯卡因酰胺、茶堿等可進(jìn)行主體含量的測定,對(duì)硝*甘油可測定主體含量及其降解產(chǎn)物,以便保證藥物的熱量。


液相色譜作為常規(guī)分析方法在藥物分析中的應(yīng)用


液相色譜法作為藥物分析中的主要的分析方法,常被作為常規(guī)分析和檢驗(yàn)方法。近年來在這個(gè)方面的研究比較多,劉樹業(yè)等為時(shí)刻監(jiān)控治療肝癌時(shí)的抗癌藥物劑量即血中的藥物濃度,提高療效,減少副作用,采用紫外-HPLC法對(duì)血中和組織中的阿霉素濃度進(jìn)行分析。用UV-240紫外分光光度計(jì),BECKMAN332型液相色譜儀,采用反向色譜法。針對(duì)近幾年國際奧委會(huì)醫(yī)學(xué)委員會(huì)公布的禁用表中新增藥物及一系列利尿劑的相關(guān)化合物進(jìn)行了研究,比較了不同的提取方法及回收率,研究了幾種藥物的排泄情況;建立了同時(shí)分析13種利尿劑的液相色譜測定方法,檢出限小于5ng。用0.02mol/L的三羥甲基胺基甲烷(用磷酸調(diào)pH值至7)和甲醇(含2%乙酸和0.25%庚烷磺酸鈉)作流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,建立了脂性油膏藥物中黃芩甙含量的反相液相色譜分析方法,本法分析速度快,重現(xiàn)性好,黃芩甙的平均回收率為103.7%。


液相色譜在藥物殘留測定上的應(yīng)用


由于液相色譜能夠?qū)繌?fù)雜組分進(jìn)行定量分析,被廣泛使用于藥物殘留的測定上。以液相色譜法建立了豬、羊、雞肝組織中西*因殘留量的檢測方法。采用ODS色譜柱,二極管陣列檢測器,甲醇/水(65/35)為流動(dòng)相,222nm檢測波長下進(jìn)行檢測。西*因?qū)φ掌啡芤旱牡蜋z測限為0.1mg/L,線性范圍為0.1~20mg/L,標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:y=-22459.83+454684.31x,線性關(guān)系良好(r=0.9999)。樣品以乙腈提取,并加入無水硫酸鈉和正已烷,過濾后去除雜質(zhì),乙腈層在45~50℃下水浴氮?dú)獯蹈?,殘?jiān)眉状既芙夂?,進(jìn)樣分析。平均回收率均大于80%,日間和日內(nèi)變異系數(shù)均小于10%。符合藥物殘留痕量分析要求。研究了動(dòng)物源性食品中甲氧芐胺嘧啶藥物殘留的提取、凈化和液相色譜分析條件,建立了液相色譜法測定動(dòng)物性食品中甲氧芐胺嘧啶藥物殘留的方法,該法檢測限0.025mg/kg,回收率為84%~98%。此外,在人血中藥物含量的測定中也有很多的應(yīng)用。建立了血漿及尿液中異*肼的液相色譜快速測定方法,以滿足臨床藥物分析和法醫(yī)學(xué)鑒定的需要,提高對(duì)血漿及尿液中異*肼濃度檢測的準(zhǔn)確性。以香草醛為衍生化試劑,將異*肼經(jīng)柱前衍生為異*肼香草醛腙,直接對(duì)處理后樣品中的腙進(jìn)行定性、定量分析。以在空白人體液樣本中定量添加標(biāo)準(zhǔn)異*肼的方法考察了樣品的前處理方法、儀器條件、線性范圍、精密度、回收率等,并對(duì)健康受試者血液中的異*肼濃度進(jìn)行了監(jiān)測。


液相色譜法由于分析速度快、分離效率高、檢測靈敏度高、檢測自動(dòng)化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理較簡單等優(yōu)點(diǎn)在確定藥方案和治療劑量,以及藥物動(dòng)力學(xué)分析和藥效學(xué)評(píng)價(jià)提供了方法的基礎(chǔ),有著廣泛的應(yīng)用前景。




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